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標題: Polysciences PEI轉染試劑介紹
在生命科學研究,特別是基因功能研究、蛋白表達和基因治療等領域,將外源核酸(DNA、RNA)高效、安全地導入細胞內部是至關重要的實驗步驟,這一過程稱為轉染。Polysciences公司作為國際z名的生命科學試劑與材料供應商,憑借其深厚的技術積累,開發(fā)了一系列性能z越的轉染試劑,為全球科研工作者提供了高效、可靠的工具。以下是關于Polysciences PEI轉染試劑的深度解析
一、 Polysciences PEI轉染試劑核心優(yōu)勢
1. 廣譜高效性
- 細胞兼容性極廣:成功驗證于HEK293、CHO、HeLa等常見細胞系,及原代細胞、干細胞、懸浮細胞(如Jurkat)等難轉染類型。
- 多核酸適配:適用于質粒DNA、siRNA、mRNA及CRISPR-Cas9組件,尤其擅長大質粒(>10kb) 轉染。
2. 成本效益比突出
- 價格僅為商品化試劑(如jetPEI®)的1/5-1/3,1g裝售價約$100,可配制500mL以上工作液,單次轉染成本低至$0.1。
3. 定制化靈活性
- 提供線性PEI(25 kDa) 與 支鏈PEI(25/40/60 kDa) 多分子量選擇:
- 25 kDa線性PEI:毒性低,適合原代細胞
- 40 kDa支鏈PEI:轉染效率高,適用標準細胞系
二、 Polysciences PEI轉染試劑性能實測對比
指標 | Polysciences PEI | 進口競品(如jetPEI®) |
HEK293效率 | 85-95% | 90-98% |
CHO細胞存活率 | >80% | >85% |
懸浮細胞效率 | 60-75% (Jurkat) | 65-80% |
批間穩(wěn)定性 | 需自行質檢 | 預質檢認證 |
三、 Polysciences PEI轉染試劑操作關鍵點
1. 工作液配制
- 將PEI粉末溶解于無菌pH 4.5鹽酸溶液,煮沸10分鐘,調pH至7.0后過濾除菌(避免直接使用PBS導致沉淀)。
2. 轉染復合物比例
- 黃金比例范圍:
- DNA : PEI = 1μg : 2-4μg(貼壁細胞)
- DNA : PEI = 1μg : 3-6μg(懸浮/難轉細胞)
- 孵育時間:15-30分鐘(室溫)
3. 毒性控制技巧
- 轉染后6小時更換培養(yǎng)基,降低長期毒性
- 難轉染細胞添加0.1mM丁酸鈉提升表達
四、 Polysciences PEI轉染試劑適用場景推薦
- 強烈推薦:
- 大規(guī)模生產(病毒包裝、蛋白表達)
- 經費有限的實驗室高頻次轉染
- 大片段DNA(>15kb)遞送
- 謹慎使用:
- 對細胞毒性極度敏感的神經元
- 無血清培養(yǎng)體系(需優(yōu)化復合物緩沖液)
五、 Polysciences PEI轉染試劑缺陷與應對
1. 批次差異風險
- 每批PEI需用報告基因質粒(如pEGFP) 預實驗確定最佳比例。
2. 沉淀問題
- 復合物出現(xiàn)絮狀沉淀時,加入5-10%葡萄糖改善分散性。
3. 支原體污染
- 購買后立即分裝凍存,使用前過濾(0.22μm)。
> 結論:Polysciences PEI是預算敏感型實驗室的s選。其廣譜性、高載量能力和極低單價優(yōu)勢顯著,但需付出優(yōu)化成本。掌握配制與比例控制要點后,可穩(wěn)定獲得媲美進口試劑的效果,特別推薦用于病毒生產和大規(guī)模轉染項目。
注:建議s選貨號24765-1(線性PEI 25kDa),適用性廣,毒性可控。
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