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細胞凍存是細胞培養(yǎng)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié),直接影響細胞存活率和活力,關(guān)系到后續(xù)細胞實驗?zāi)芊癜凑沼媱澯行У剡M行。掌握好細胞凍存的小Tips,有助您做好細胞培養(yǎng)式樣,讓我們一起來看看吧!一、細胞凍存的基本原則細胞凍存遵循“慢凍”原則:讓細胞在超低溫環(huán)境中緩慢進入“冬眠”狀態(tài),暫時停止其代謝活動。目的是保存細胞樣本,方便復(fù)蘇。二、細胞凍存的注意事項1.溫度控制不穩(wěn)定可能導(dǎo)致細胞存活率降低二甲基亞砜(DMSO)或甘油常作為冷凍保護劑,保護細胞。DMSO能快速穿透細胞膜進入細胞,降低冰點,延緩凍...
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在選擇ELISA試劑盒時,不同的用戶往往有不同的選擇標準,無論是靈敏度、樣本類型還是簡便性,核心標準是ELISA試劑盒的重現(xiàn)性。一、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測樣本的種類一般來說,生產(chǎn)廠家都會在產(chǎn)品名稱上標明種屬,ELISA試劑盒種屬:人、小鼠、大鼠、兔、猴等。待檢樣本種類:體液、血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿等。二、試劑盒的檢測范圍就是標準曲線范圍,特別要注意待測樣本濃度是否落在標準曲線范圍內(nèi),對于高濃度樣本,需要先進行預(yù)實驗摸索到比較好的稀釋倍數(shù)后再大量測定樣本。三...
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組氨酸標簽也稱His-tag,是一種簡單、應(yīng)用廣泛的純化標簽,具有六個或更多連續(xù)的組氨酸殘基,其可插入目的蛋白的C末端或N末端。一是能構(gòu)成表位利于檢測;二是構(gòu)成的結(jié)構(gòu)特征(結(jié)合配體)利于純化。His標簽我們經(jīng)常會看到,做蛋白親和純化的小伙伴們應(yīng)該就沒有沒聽過His名號的吧。可是它究竟從何而來呢?一、起源1975年,J.Porath等人的研究論文中,實驗者將金屬螯合親和層析(簡稱MCAC)技術(shù)應(yīng)用于蛋白分離。研究者首先將金屬離子(如Cu2+、Ni2+等)固定到IDA-衍生的凝膠...
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一、前言經(jīng)常做實驗的小伙伴都知道,從事細胞培養(yǎng)工作時都有可能面臨細胞受到污染的境況。對于細胞的受污染問題,最為緊要的在于防范,因為一旦細胞受到污染,欲挽回已十分艱難,即便成功挽回,細胞的狀態(tài)亦會受損,進而對實驗結(jié)果造成影響。因此,讓我們首先探討一下如何有效地進行預(yù)防。生物安全柜是細胞處理的主要場所,而培養(yǎng)箱是細胞生長的主要場所,所以細胞污染通常就發(fā)生在這兩個地方。那么在使用生物安全柜和培養(yǎng)箱時如何做好預(yù)防措施呢?二、措施1.所有進入安全柜的東西都要盡可能保證無菌如果實驗室條件...
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